Deteksi Mikotoksin dan Toksin Kerang Ikan

................................................................................................................

................................................

Mikotoksin merupakan senyawa kimia beracun yang dihasilkan oleh jamur. Terdapat beberapa mikotoksin yang telah menjadi perhatian dalam industri; Aflatoksin B1, B2, G1, G2; Aflatoksin M1; Fumonisin B1, B2, B3; Zearalenon; Ochratoksin A; dan lainnya. Mikotoksin tersebut dapat memberikan efek terhadap manusia dan hewan karena bersifat karsinogenik. PT. Arasains menawarkan berbagai macam alat pengujian yang dapat membantu mendeteksi mikotoksin menggunakan lateral flow (RIDA®QUICK), metode ELISA (RIDASCREEN®) dan immunoaffinity column (IAC) untuk HPLC.

Standar internasional dan kode praktek untuk mikotoksin ditetapkan oleh Codex Allimentarius (www.fao.org/fileadmin/user_upload/agns/pdf/CXS_193e.pdf). Di Uni Eropa, standar untuk mycotoxin tercantum dalam commission regulation EC No 1881/2006 (eur-lex.europa.eu/legal-content/EN/TXT/). Di Indonesia, batas residu maksium untuk mikotoksin pada makanan tercantum dalam Peraturan BPOM nomor 8 tahun 2018 (standarpangan.pom.go.id/dokumen/peraturan/2018/Salinan_PerBPOM_8_Tahun_2018_tentang_Cemaran_Kimia_Pangan_Join.pdf) dan untuk pakan ternak tercantum dalam SNI 4483:2013.

Konsentrasi tinggi dari toksin kerang ikan (shell fish toxin)dapat terakumulasi pada berbagai filter feeders seperti kerang, mussels, dan oysters. Terdapat empat sindrom yang biasanya disebabkan oleh keracunan kerang ikan antara lain paralytic shell fish poisoning (PSP), diarrhetic shell fish poisoning (DSP), neurotic shell fish poisoning (NSP), dan amnesic shell fish poisoning (ASP). Toksin poliether asam okadiak dan analognya dinophysistoksin DTX1, DTX2, DTX3 menyebabkan DSP.

Regulasi Uni Eropa EC 385/2004 (eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do) menyatakan bahwa moluska hidup tidak boleh mengandung asam okadiak dan/atau yang sejenisnya seperti dinophysistoksin dan pectenotoxin lebih dari 160 µg per kilo. Regulasi Uni Eropa EC No. 853/2004 menyatakan bahwa moluska tidak boleh mengandung toksin PSP (toksin saxi dan analognya) lebih dari 800 µg per kg. Di dalam regulasi Uni Eropa EC No. 853/2004 (eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do) menetapkan bahwa kerang moluska hidup tidak boleh mengandung toksin PSP (saxitoxin dan analognya) dalam jumlah total (diukur dalam seluruh tubuh atau setiap bagian yang dapat dimakan secara terpisah) yang melebihi batas 800 µg per kg.

Prinsip Kerja Lateral Flow Strip pada Deteksi Mikotoksin

Lateral flow strip mudah digunakan dan hanya membutuhkan sedikit alat. Sampel diletakkan pada pad sampel. Diluen sampel yang terdapat di dalam sampel mengalir ke atas melalui pergerakan kapiler dan melewati pad konjugat. Disini antigen contohnya mikotoksin membawa konjugat colloidal dan membawanya menuju garis tes dimana antibodi yang menempel pada strip nitroselulosa akan mengambil antigen yang berikatan dengan konjugat. Konjugat berwarna sehingga akan memberikan warna pada garis. Konjugat yang tidak berikatan dengan antigen akan terbawa dari garis tes ke garis kontrol (control line) dimana akan memberikan garis warna lainnya. Sampel positif akan memberikan dua garis berwarna dan negatif akan memberikan satu garis berwarna pada garis kontrol.

RIDA®QUICK Lateral Flow Strip Mikotoksin

RIDA®QUICK Mikotoksin

RIDA®QUICK merupakan uji imunokromatografi untuk semi kuantitatif (evaluasi visual) atau kuantitatif (evaluasi dengan RIDASMART APP) analisa mikotoksin. Format yang digunakan adalah lateral flow strip. Tersedia untuk analisa aflatoksin, DON, zearalenon, fumonisin, dan T2/HT-2. Sebelum menggunakan strip uji, ekstraksi dengan menggunakan ethanol/methanol perlu dilakukan.

Keunggulan:

• Hasil yang cepat
• Preparasi sampel dan prosedur assay yang mudah
• Memungkinkan untuk memberikan keputusan langsung (on-site) terhadap kontaminasi mikotoksin
• Terdapat pilihan untuk determinasi semi-kuantitatif/kuantitatif

RIDA®SMART APP:

RIDA®SMART APP memungkinkan untuk mengukur mikotoksin secara kuantitatif dengan menggunakan lateral flow strip. Aplikasi ini dipasang ke dalam smartphone dan dipindai (scan) menggunakan kamera dari smartphone sehingga memungkinakn instensitas warna akan berkorelasi terhadap konsentrasi mikotoksin. Apilkasi ini memberikan hasil yang terpercaya, sehingga dapat langsung dikirim melalui e-mail, diekspor ke server lainnya atau dicetak.

RIDASCREEN® ELISA Microtiter Plate

Competitive ELISA

Uji RIDASCREEN® ELISA mikotoksin berdasarkan kompetitif immuno-assay. Dasar dari microtiter plate dilapisi dengan antibodi yang anti terhadap mikotoksin tertentu. Sampel yang mengandung antigen ditambahkan bersamaan dengan antigen konjugat. Antigen pada sampel akan berkompetisi dengan antigen konjugat untuk berikatan pada antibodi yang melapisi microtiter plate. Substrat pewarna kemudian ditambahkan ke dalam well dan tingkat kepekatan warnanya bergantung pada jumlah mikotoksin tersebut. Semakin banyak mikotoksin berarti semakin rendah intensitas warnanya sehingga memberikan kurva yang menurun. Wells dibaca dengan mengunakan microtiter plate reader.

RIDASCREEN® ELISA untuk Pengujian Mikotoksin

Menggunakan interaksi antigen dan antibodi dengan spesifitas tinggi untuk mendeteksi dan menghitung mikotoksi dengan menggunakan pengukuruan fotometrik. Analisa akhir dilakukan dengan menggunakan RIDA®SOFT.Win.

Keunggulan:

• Hasil kuantitatif
• Sensitifitas dan spesifisitas tinggi
• Cepat dan terpercaya
• Dapat mendeteksi jumlah sampel yang tinggi
• Automasi dengan menggunakan ChemWell dan Thunderbolt

RIDASCREEN® Mycotoxin

Immunoaffinity Column

Immunoaffinity Column

• Multianalisa dengan menggunakan HPLC dan LC-MS/MS
• Mengurangi interferensi latar belakang untuk meningkatkan hasil yang akurat
• Multiple aplikasi
• Tersedia dalam formal 1 mL dan 3 mL

Parameter:

• Citrinin
• Sterigmatosistin
• Aflatoksin Total
• Aflatoksin M
• Zearalenon
• Trichothecene P
• T-2 & HT-2
• Okratoksin A
• DON
• Multitoksin DON, Zearalenon, T-2 & HT-2
• Multitoksin untuk aflatoksin dan okratoksin
• Multitoksin untuk aflatoksin, okratoksin dan fumonisin
• Multitoksin untuk aflatoksin, okratoksin dan zearalenon

R-Biopharm Mikotoksin Card untuk Analisa Kualitatif

Aflacard

Ini merupakan kartu skrining kualitatif untuk mendeteksi mikotoksin pada berbagai tingkat. Kit ini berdasarkan pada tekhnologi deteksi antibodi monoklonal dalam format kartu. Toksin diekstraksi dari sampel yang sudah disaring dan melalui immunoaffinity column sebeleum diencerkan dan ditambahkan ke kartu. Konjugat ditambahkan ke kartu dan konjugat yang tidak berikatan kemudian dihilangkan dengan pencucian. Substrat tidak berwarna ditambahkan dan kartu diinkubasi selama 5 menit. Terakhir, stop solution ditambahkan dan hasil diinterpretasikan seperti dibawah ini.